Препараты гризина
Гризин - полифракционный антибиотик, относящийся к группе стрептотрицинов, различающихся лишь количеством а,B-лизина.
Строение стрептотрициновых антибиотиков можно представить следующей структурной формулой:
n - количество а,B-лизина (может быть от 1 до 6). Антибиотики этой группы построены из остатков двух основных аминокислот а,B-лизина и стрептолидина и одного аминосахара a-D-гулозалина.
Антибиотик, продуцируемый культурой Act. griseus, представляет собой серовато-белый порошок, обладающий основными свойствами. Он гигроскопичен, хорошо растворим в воде, ацетоне, эфире и спирте. Активность чистых препаратов достигает 1000 ед./мг. Гризин активен против грамположительных и грамотрицательных бактерий, микроскопических грибов и оказывает стимулирующее рост действие при скармливании молодняку животных, повышает их плодовитость.
Препарат гризина в форме кормогризина предложен Всесоюзным институтом животноводства и Институтом микробиологии АН СССР. Кормогризин представляет собой высушенную в распылительной сушилке культуральную жидкость Act. griseus. Препарат выпускается в форме кормогризина-5, 10, 40.
Основные требования, предъявляемые к качеству кормогризина, приведены ниже.
В качестве наполнителя при стандартизации препарата могут быть использованы кукурузная мука, отруби, гидролизные дрожжи, сухой свекловичный жом.
Исходная культура Act. griseus штаммы 70 и 12 сохраняется на агаризованных средах или в виде спорового материала, выращенного на пшене. Размножение посевного материала предусматривает выращивание культуры в колбах на качалке в две генерации и в посевном аппарате. Культура в колбах выращивается на среде следующего состава (в %): крахмал 1,5, кукурузная мука 2,0, селитра аммиачная 0,5, соль поваренная 0,2, фосфат калия однозамещенный 0,02, мел 0,3, pH среды 6,8-7,3. Длительность культивирования на первой и второй стадиях при температуре 26-28 °С 24 ч.
Посевной материал второй генерации после проверки морфологического состояния культуры, отсутствия свободного фага и посторонней микрофлоры используется для засева питательной среды посевного аппарата в количестве 0,05-0,1% от его объема. Питательная среда для посевного аппарата имеет следующий состав (в %): кукурузная мука 2, крахмал картофельный 1,5, селитра аммиачная 0,7, мел 0,3, поваренная соль 0,2, фосфат калия однозамещенный 0,02, сульфат магния 0,05, жир кашалотовый 0,2, pH среды 6,8-7,3. Культура выращивается при температуре 26-28 °С, постоянном перемешивании и аэрации 1 л/(л-мин) в течение 20-26 ч.
Производственное культивирование проводится на среде следующего состава (в %): мука кукурузная 2,0, крахмал картофельный 1,8, сульфат аммония 0,6 или нитрат аммония 0,7, соль поваренная 0,2, мел 0,5, фосфат калия однозамещенный 0,02, сульфат магния 0,05, жир кашалотовый 0,15-0,2, среда имеет pH 6,5-7,3. Культивирование ведется при температуре 26-28 °С, постоянном перемешивании и аэрации в течение 48-60 ч. Культуральную жидкость активностью не менее 1000 мкг/мл при температуре 50 °С упаривают в 3-4 раза под вакуумом. Активность получаемого концентрата должна быть не ниже 3000 ед./мл при выходе 85% от культуральной жидкости.
При распылительной сушке температура воздуха, поступающего в сушильную башню, составляет 150° С, а выходящего - 65 °С. Из 1 м3 концентрата культуральной жидкости получают 85-100 кг сухого продукта. Потери на стадии сушки составляют 10-11%.